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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  常規(guī)試劑  >  試劑  >  A3828-01Bst 4.0 LS Bead(Low Salt)試劑

Bst 4.0 LS Bead(Low Salt)試劑

簡要描述:Bst 4.0 LS Bead(Low Salt)試劑,雅吉生物細(xì)胞ATCC引種,代次靠前,細(xì)胞活率高狀態(tài)好,售后完善,更多細(xì)胞系,原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,elisa試劑盒歡迎新老客戶咨詢訂購

  • 產(chǎn)品型號:A3828-01
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-10-31
  • 訪  問  量:607

詳細(xì)介紹

Bst 4.0 LS Bead(Low Salt)試劑該制品為單一組分的 Mix(2.5 倍濃度),包含了低

濃度緩沖鹽(Low Salt)、Mg

2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA

聚合酶等,使用時只需要加入引物、模板即可進(jìn)行核酸恒

溫擴(kuò)增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板

的聚合酶活性(逆轉(zhuǎn)錄),還具有依賴于 DNA 的聚合酶活

性,因此無論 DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進(jìn)行恒

溫擴(kuò)增。

由于 LAMP 在反應(yīng)時會產(chǎn)生大量的 H+,導(dǎo)致反應(yīng)體

系 pH 下降(通常由 pH8.8,下降到 7.2 以下),因此,低

緩沖鹽體系條件下,可搭配 pH 敏感染料實現(xiàn)可視化檢測

LAMP 檢測。該制品中包含低濃度 Tris(pH8.8)緩沖鹽,

在搭配 pH 敏感染料的情況下,可進(jìn)行變色 LAMP 擴(kuò)增。

除此外,本試劑中不含有甘油,可用于建立凍干體系。

貨 號 名 稱 規(guī)格

A3824-01 2.5xBst4.0 LowSalt Mix 1 ml

儲存:-20℃保存 1 年;-80℃保存 2 年;短期使用放置于

2-8℃,保存 1 個月。反復(fù)凍融 10 次,不影響使用。如有

白色沉淀,于 37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀,不影響

使用。

使用實例(以 LAMP 紅黃變色擴(kuò)增為例):

1. 搭配使用紅色 pH 指示染料(貨號:A3828-23),進(jìn)行

LAMP 變色反應(yīng)。

2. 配制反應(yīng)體系

2.5xBst4.0 LowSalt Mix 10 μl

10xRed pH Dye 2.5 μl

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到總體積 25 μl

3. 蓋上管蓋,置于 65°C 進(jìn)行反應(yīng) 20~30min。 肉眼觀

察結(jié)果,黃色為陽性,紅色為陰性。

4. 10xLAMP Primer Mix 的配制,F(xiàn)IP/BIP 分別為 16 μM、

LoopF/B 分別為 4~8 μM、F3/B3 分別為 2 μM。引物的稀

釋液均使用 ddH2O(pH8.0-9.0),不能使用含有 Tris 緩

沖鹽系統(tǒng)。由于該變色方法對 pH 敏感,多數(shù)情況下引物

溶解后成酸性,因此在 10x 引物中加入終濃度 1 mM

NaOH 使引物恢復(fù)到中性 pH(~8.5),注意 NaOH 需新

鮮配制,可配制成 50-100 mM 濃度使用。

其它注意事項:

(1)該試劑對影響 pH 的緩沖鹽敏感,因此模板中 Tris

鹽、NaOH 等成分對反應(yīng)有至關(guān)重要的影響。在采用核酸

純化的樣本檢測時,推薦使用 ddH2O 進(jìn)行洗脫。

(2)在使用粗制樣本時建議使用 ddH2O 保存的樣本進(jìn)行

檢測。在對粗制樣本進(jìn)行檢測時,最佳的粗制樣本為拭孖

樣本,拭孖樣本經(jīng) ddH2O 浸泡后,可以直接使用浸泡液

作為模板進(jìn)行擴(kuò)增,無需核酸純化步驟。

(3)關(guān)于 DEPC 水使用的特殊說明:由于 DEPC 處理過

的 ddH2O 顯示很強(qiáng)的酸性,會直接導(dǎo)致反應(yīng)體系變?yōu)辄S

色。所以 DEPC 處理過的 H2O 必須經(jīng) NaOH 溶液調(diào)整

pH 到 8.0-9.0 后方可使用。我們推薦直接使用,水機(jī)制

備的 18.2ΩH2O,不影響 RNA 樣本的擴(kuò)增。

(4)該試劑中不含有甘油組分,因此具有凍干經(jīng)驗的人

員可進(jìn)行凍干試劑的開發(fā)。

源性成分.png

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